Аналіз дифузії в лунках агару Цей метод часто використовують для перевірки антимікробної активності речовин рослинного походження (44, 45). Бактеріальний ізолят, змішаний з м'яким агаром, виливають на чашку і охолоджують. Потім лунки вирізають стерильним буром (діаметром 4–8 мм) і в кожну лунку поміщають досліджувані речовини..
Техніка дифузії в агарі – це напівкількісний аналіз, який складається з нанесення певної кількості зразка з відомою концентрацією (рослинного екстракту, фракції екстракту або чистої речовини) на поверхню агару, яка попередньо була засіяна стандартизованою кількістю грибків. клітини.
Недоліки такі деякі бактерії погано або зовсім не ростуть на середовищах, і мінімальна інгібуюча концентрація (МІК) не може бути визначена. Коли використовується методика мікророзведення бульйону, задану концентрацію бактерій інокулюють у кожну лунку 96-лункового планшета, що містить антимікробний препарат.
Одним із методів є аналіз дифузії в агарі кількісне визначення здатності антибіотиків пригнічувати ріст бактерій. Інтерпретація результатів цього аналізу базується на модельно-залежному аналізі, який базується на припущенні, що антибіотики вільно дифундують у твердому поживному середовищі.
Процедура
- Крок 1: Підготуйте тарілки. Вийміть чашки з агаром Мюллера Хінтона з холодильника. …
- Крок 2: Зробіть підвіску. …
- Крок 3: Інокуляція пластин. …
- Крок 4: Розмістіть диски. …
- Крок 5: Інкубуйте. …
- Крок 6: Виміряйте зони інгібування.
Досить подібний до методу дифузії в агаровому диску, метод дифузії в агарі складається з зробити отвір діаметром 6 мм в агарі, заповненому зразком для тестування. Потім вимірюють зону інгібування, утворену дифузією зразка в агарі (Холдер і Бойс, 1994).